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蛋白酶K重组蛋白酶K

描述:蛋白酶K重组蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键;用于质粒或基因组DNA的分离 ;RNA的分离;属于细胞裂解液;

更新时间:2021-02-05
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     蛋白酶K重组蛋白酶K详细介绍:

  蛋白酶K是一种丝氨酸蛋白酶,具有蛋白水解酶活性,并能在一系列广泛的环境(pH(4-12.5),高盐缓冲液,70℃的高温等)中保持活性。另外,蛋白酶K的活性不受SDS、尿素、EDTA、盐酸胍、异硫氰酸胍等的抑制,且一定含量的去垢剂还可以增强蛋白酶K的活性。
  英文名称:Proteinase K
  分子式:C29H27N2O12P
  分子量::626.504641
  CAS   39450-01-6
  储存条件 2-8℃
  酶活/效价 40unit/mg dry weight
  外观(性状) 白色粉末至类白色粉末
  酶活:40u/mg
  规格:10g/瓶;20g/瓶
  蛋白酶K重组蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键;用于质粒或基因组DNA的分离 ;RNA的分离;属于细胞裂解液;
  失活RNase, DNase以及反应中的其他酶类 ;
  蛋白酶K的大规模生产难点:
  1、表达量低:
  蛋白酶K能够非特异性的降解大多数蛋白,对于表达宿主细胞造成严重毒性,因此蛋白酶K的表达量一般都很低。筛选高表达蛋白酶K的表达系统和菌株,一般需要较长的周期。
  2、色素和核酸的残留:
  大规模发酵,引入大量色素和宿主核酸的残留,简单的纯化工艺很难除去这些杂质,而复杂的纯化又增加了成本和降低了回收率。
  3、不稳定性:
  蛋白酶K不够稳定,自己能酶解自己,在无保护剂时,37℃很难长期稳定保存。
  4、易沉淀:
  在制备蛋白酶K的冻干粉时,为了保证冻干粉中蛋白酶K的固含量较大,需要在高浓度时加入冻干保护剂,但是蛋白酶K在浓度达到20mg/mL及以上时,很容易聚集形成沉淀,这给蛋白酶K的高固含量冻干带来很大的困难。
  5、投入大:
  蛋白酶K具有很强的蛋白酶活性,能够将实验室的其它蛋白酶解,所以蛋白酶K需要专门的产地、仪器设备、人员来进行研发与生产。

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